怎样制作银耳菌种的母种？

银耳必须同时有银耳菌丝体和香灰菌丝体才能长穗，银耳菌母种怎么制作？这里简单介绍一下。在制作母种的过程中，可选择耳材分离法和孢子分离法。

1、木耳分离法

从真菌中分离的菌株包括银耳菌丝体和香灰菌丝体。其分离步骤如下。第一步，当银耳长出1~2批时，选择生长旺盛、花大、色白、肉厚、片状正常、产量高、无病虫害的木耳，锯断1~2批来自子实体部分的银耳。取厚2cm的切片，除去穗基部和树皮，用75%酒精擦拭表面，放入灭菌后的接种盒中。

第二步，将木块浸入0.1%氯化汞溶液中20-30秒，用无菌水冲洗剩余的药液，然后用无菌纱布擦干。第三步，用消毒过的小锤子和手术刀将木屑劈开靠近耳根的位置（选择有大理石花纹的地方），然后将木屑劈成火柴棍粗细的小木条（或用锋利的刀切掉粉状的）。锯末）。第四步，用无菌镊子将木条（或小木屑）插入斜面培养基中。

第五步，试管在23~25培养，此时木条（或木屑）上长出细细的白色菌丝并延伸至培养基。此时培养基颜色由黄变黑，表面出现浅灰色条纹，就是香灰菌丝体。 7天后，木条上出现短而蓬松的菌丝，同时分泌出白色或淡黄色的水滴，这就是银耳菌丝体。生长过程中发现红、绿、黄、黑等孢子和螨类害虫应及时消灭，但淡黄色隆起的糊状小菌落是孢子，不是杂菌。第六步，挑取少许银耳菌丝体和香灰菌丝体，接种在新的斜面培养基上，进行扩培。一周后，菌丝体将覆盖试管，成为母种。

2、孢子分离法

孢子分离出的细菌萌发成孢子（银耳孢子在一般马铃薯和琼脂培养基上易形成孢子）或银耳菌丝，可用于栽培种的复壮或与香灰菌丝混合制成母种。步骤如下。第一步，取数个50ml的锥形瓶，各装0.5cm厚的培养基，灭菌备用。第二步，选择花大、肉厚、色白、切片正常、大小适中、无病菌、无病虫害、成熟穗八九个的鲜穗作为种穗，移入无菌接种箱中，并用无菌水反复冲洗数次。第二次评价。

第三步，用消毒过的纱布或吸水纸将耳承表面擦干。第四步：用消过毒的手术刀切出一小块耳瓣，挂在消过毒的金属挂钩上，迅速移入三角瓶中。钩子的另一端钩在三角瓶口上，使耳瓣距培养基表面23cm，盖上棉塞。第五步，将烧瓶置于23-25培养48小时，培养基表面可见雾状孢子和乳白色、糊状、边缘光滑凸起的小菌落。此时取出灭菌后的接种盒内的钩翼和耳翼，插上棉塞，2325继续培养。 23天后，培养基表面出现乳白色、半透明、微发亮，表面粘稠、边缘光滑、中央凸起的孢子菌落。

孢子在一般培养基上不易发芽，但在下列培养基上可发芽：60%玉米粉、34%木屑、1%骨粉、1%过磷酸钙、0.1%硫酸铵；细米粉98%，骨粉1%，硫酸铵0.1%；粘米粉50g，花生米（细碎）40g，蔗糖20g，琼脂20g，水1000ml；马铃薯200克（去皮）、琼脂23克、蔗糖20克、过磷酸钙2克、水1000毫升，pH值5.66.2；细米粉500克，麦麸500克，骨粉10克，过磷酸钙10克，硫酸铵1克，拌匀，加水调成糊状，揉成条状放入试管中，压紧用竹片成斜坡；配合香灰的菌丝体，或在香灰菌丝体提取物制成的培养基上。

香灰菌丝分离法制作母种。其分离栽培同上述耳材分离法，即用接种刀小心去除耳材表面的老菌丝，取出深处有黑色花纹的部分，捣成米粒大小，接种于斜面培养基上。香灰的菌丝具有很强的爬壁能力。选择顶点的白色部分并将其移液以进行纯化。经过3~5次提纯，即可得到纯正的香灰菌丝体。也可以取一瓶已经长到底部的银耳木屑菌，将瓶子打碎，取出柱子，用接种针刮去顶部灰绿色或黑色的斑点，取少量孢子，接种将它们放在倾斜的介质上，进行培养和净化。这两种分离方式中，前者的生命力最强。

混养也可用于制作母种。将经孢子分离法培养的银耳菌丝体与香灰菌丝体分离法纯化后的香灰菌丝体混合培养，形成母种。值得注意的是，不同地区不同耳材分离出来的银耳菌丝体和香灰菌丝体不能随意互换或组合，否则可能会失败。培养母种的方法是先将银耳菌丝体接种在斜面培养基上，25培养。当银耳菌丝直径长到1厘米时，再用香灰连接菌丝。当菌丝蔓延到整个试管时，就是母种。必须指出的是，如果银耳菌丝少，香灰菌丝多，以后就不会出穗，或者出穗率很低。 （来源：百度猪妹邂逅）